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技術(shù)文章

熒光定量PCR儀與普通PCR儀的區(qū)別

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    熒光定量PCR儀比普通的PCR儀多了熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng),實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀主要是用來定量分析和確定基因轉(zhuǎn)錄水平的,而普通的PCR儀是做定性分析和擴(kuò)增基因片段,定量PCR儀可以做普通PCR儀的工作,而反之就不行了,況且這樣代價(jià)太大了,一般的實(shí)驗(yàn)室都不允許這樣做的。總之兩者的功能不能互相取代。
    普通的基因擴(kuò)增儀(PCR儀)只能夠定性地分析是否存在目標(biāo)片段。但是價(jià)格要低很多,而且運(yùn)行成本也要低很多。不過不能直接得到擴(kuò)增結(jié)果,還需要做電泳檢測。實(shí)際中檢測遺傳疾病,品種分子標(biāo)記篩選,甚至親自鑒定等都可以由普通PCR儀完成。
    但是,某些需要定量的實(shí)驗(yàn)就必須用到實(shí)時(shí)定量PCR了。比如檢測某些病原物的數(shù)量(血液乙肝病毒復(fù)制程度),特定基因的表達(dá)量(比如結(jié)合反轉(zhuǎn)錄做的RNA定量分析),某些基因在染色體組中拷貝數(shù)(以前往往使用southern blot技術(shù))等等。熒光定量PRC一般不需要對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳分析,操作相對(duì)簡單些,但是耗材實(shí)在是貴。
    簡單來說,看有沒有用普通PCR儀,看有多少用熒光定量PCR 。基因擴(kuò)增儀只能擴(kuò)增,不能檢測,便宜。熒光定量PCR儀除了擴(kuò)增,還能在擴(kuò)增的同時(shí)檢測DNA發(fā)出的熒光信號(hào),試劑和儀器都更貴。
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