ELISA試劑盒顯色溫育反應(yīng)

　　ELISA試劑盒約40分鐘顯色達(dá)，隨即逐漸減弱，至2小時(shí)后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉（SDS）等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時(shí)間（12-24小時(shí)）不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，此時(shí)可用特定的波長（450nm）測讀吸光值。

　　ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中顯色是ELISA試劑盒中的zui后一步溫育反應(yīng)，此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi)，陰性孔可保持無色，而陽性孔則隨時(shí)間的延長而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測定中，ELISA試劑盒加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測定的顯色可在室溫進(jìn)行，時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制，有時(shí)可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯se情況適當(dāng)縮短或，及時(shí)判斷。

　　ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作程序簡述：

　　1.準(zhǔn)備試劑，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品；

　　2.加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng)30分鐘；

　　3.洗板5次，加入酶標(biāo)試劑，37℃反應(yīng)30分鐘；

　　4.洗板5次，加入顯色液A、B，37℃反應(yīng)10分鐘；

　　5.加入終止液；

　　6.15分鐘之內(nèi)度OD值；

　　7.計(jì)算。