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技術文章

膠原檢測試劑盒的產品特點及實驗步驟

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   膠原檢測試劑盒采用與膠原特異性結合的Sircol染料,主要用于定量檢測哺乳動物組織中抽提的酸溶性膠原和體外培養哺乳動物細胞釋放到培養基中的膠原。
  溶于酸、胃蛋白等的可溶性膠原均可檢測,具體可檢測的膠原類型為I-V型,VI-XIV型膠原也可檢測,但由于難以制備標準曲線,還無法定量。Sircol染料不能區分不同類型的膠原,但可與膠原的[Gly-X-Y]n螺旋結構特異性地結合。隨著膠原變性為凝膠,該染料與膠原的結合力減弱。非脊椎動物與膠原由于變性溫度較低、羥脯氨酸殘基較少等原因,結合染料的能力較弱,需要制備種屬特異性的純化標準品,以繪制標準曲線。
  膠原檢測試劑盒的實驗步驟
  1.繪制標準曲線
  2.待測樣本的制備:取50ul樣本容易調整體積到100ul進行反應。根據反應的結果對樣本濃度進行調整,使其在標準曲線范圍內;
  3.膠原—染料復合物的獲得:加入1ml Sircol染料,混勻離心后,既得膠原—染料復合物,棄 上清,去掉未結合的染料
  4.加入1ml 染料釋放劑,將膠原—染料復合物中的染料釋放出來
  5.吸光度測定:用分光光度計540nm出定量測定。或使用colorimeter測定
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